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        Bradford蛋白濃度測定試劑盒

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        品名 規格 包裝 單價 貨期
        Bradford蛋白濃度測定試劑盒 2500微孔(250T) 247.5元 現貨
        性狀:
        組成 包裝(2500微孔) 保存
            5×G250染色液 100ml 2-8℃
            PBS稀釋液 30ml 2-8℃
            蛋白標準(5mg/ml BSA) 1ml -20℃

        本試劑盒自訂購之日起九個月內有效。

        質量標準:
        產品簡介:
            考馬斯亮蘭G-250染料,在酸性溶液中與蛋白質結合,使染料的最大吸收峰的位置(lmax),由465nm變為595nm,在一定的濃度范圍內,測定的吸光度值A595,與蛋白質濃度成正比。Bradford法測定蛋白濃度不受絕大部分樣品中的化學物質的影響。樣品中巰基乙醇的濃度可高達1M,二硫蘇糖醇的濃度可高達5mM。但受略高濃度的去垢劑影響。需確保SDS低于0.1%,Triton X-100低于0.1%,Tween 20, 60, 80低于0.06%。含去垢劑的樣品推薦使用生產的BCA蛋白濃度測定試劑盒。

        操作說明:
        一.微孔酶標儀法
            1. 完全溶解蛋白標準品,取10ml,稀釋至250ml ,使終濃度為0.2mg/ml。待測蛋白樣品在什么溶液中,標準品也宜用什么溶液稀釋。但是為了簡便起見,也可以用0.9%NaCl或PBS稀釋標準品。
            2. 5×G250染色液使用前請顛倒3-5次混勻,取1ml  5×G250染色液,加入4ml雙蒸水,混勻成 1×G250染色液,此1×G250染色液可在4℃保存一周。
            3. 將標準品按0,2,4,6,8,12,16,20微升分別加到96孔板中,加PBS稀釋液補足到20微升。
            4. 將樣品作適當稀釋(最好多做幾個梯度,如作2倍、4倍、8倍稀釋),加20微升到96孔板的樣品孔中。由于移液器在取小量時的誤差,標準線前面的點可能不很準確,所以盡可能的讓樣品點落在標準線1/2后。
            5. 各孔加入200微升稀釋后的1×G250染色液,室溫放置3-5分鐘。
            6. 用酶標儀測定A595,或560-610nm之間的其它波長的吸光度。
            7. 根據標準曲線計算出樣品中的蛋白濃度。

        二.分光光度計法
        如沒有酶標儀,可用分光光度計在離心管中混勻后加入比色皿中比色。

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