Taq Plus DNA Polymerase

         Taq Plus DNA Ploymerase是Taq酶和Pfu酶的混合物，既有5’→ 3’核酸外切酶活性，又有3’→5’核酸外切酶活性。Taq Plus DNA Ploymerase兼具Taq DNA Ploymerase的高效率及Pfu DNA Ploymerase的高保真性的特點。與Taq酶相比，Taq Plus DNA Ploymerase具有擴增長度增加(對模板有效擴增長度可達10kb)、保真度好等優點；與Pfu酶相比，具有擴增速度快、反應效率高的優勢。常用于一些對保真度要求高和模板結構復雜(如GC含量高、有二級結構等)的PCR擴增。其PCR產物可直接進行TA克隆，如需提高克隆效率，建議先純化，加A后再進行TA克隆。   

活性定義：

         1單位(U) Taq plus DNA Polymerase活力定義為在74℃，30分鐘內，以活性化的大馬哈魚精子DNA作為模板，將10 nmol脫氧核苷酸摻入到酸不溶物質所需的酶量。

質量控制：

         SDS-PAGE檢測Taq plus DNA Polymerase純度大于99%；經檢測無外源核酸酶活性；PCR方法檢測無宿主殘余DNA；能有效地擴增人類基因組中的單拷貝基因；室溫存放一周，無明顯活性改變。

酶貯存緩沖液：

         20mM Tris-HCl (pH 8.0); 0.1 mM EDTA; 1 mM DTT; 100 mM KCl ; 50% glycerol；其他成份。

適用范圍：

         用于DNA的高保真擴增，如基因表達克隆、基因定點突變、細胞內基因點突變的分析（SNP）和末端補平等。

注意事項：

1、PCR反應體系加樣時，最后一步加入Taq Plus DNA Ploymerase，整個過程宜在冰上操作。

2、取Taq DNA Ploymerase做PCR反應時，請用高壓滅菌處理過的吸頭。

3、10×Taq Plus Buffer中含15 mM Mg2+，如PCR反應需要較高Mg2+濃度，請另行加入。

4、一般情況下，Taq Plus DNA Ploymerase 可以很好地擴增10kb以下的片段。能否成功擴增更長的片段，主要與模板的結構和引物的設計有關，如果擴增長片段有困難，最好選用Long Taq DNA Ploymerase。